分光光度計(jì)是各種實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)核酸或者蛋白等樣品濃度常用的儀器之一。選擇可見(jiàn)和紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)時(shí)關(guān)鍵的指標(biāo)有三點(diǎn)：一是波長(zhǎng)范圍，二是波長(zhǎng)準(zhǔn)確度，三是雜散光參數(shù)。波長(zhǎng)范圍的選擇是由用戶實(shí)驗(yàn)需要所定，波長(zhǎng)范圍越寬的價(jià)格越貴。波長(zhǎng)準(zhǔn)確度及雜散光參數(shù)的數(shù)值越低，表示性能越好。

723N可見(jiàn)分光光度計(jì)

754N 紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)

一、分光光度計(jì)儀器注意事項(xiàng)

1、分光光度計(jì)應(yīng)該放到較干燥的房間內(nèi)，使用時(shí)放置在堅(jiān)固平穩(wěn)的工作臺(tái)上，室內(nèi)照明不宜太強(qiáng)。熱天時(shí)不能用電扇直接向儀器吹風(fēng)，防止燈泡燈絲發(fā)亮不穩(wěn)定。

2、使用儀器前，使用者應(yīng)該首先了解儀器的結(jié)構(gòu)和工作原理，以及各個(gè)操縱旋鈕之功能。

3、在未按通電源之前，應(yīng)該對(duì)儀器的安全性能進(jìn)行檢查，電源接線應(yīng)牢固，通電也要良好，各個(gè)調(diào)節(jié)旋鈕的起始位置應(yīng)該正確，然后再按通電源開(kāi)關(guān)。

4、在儀器尚未接通電源時(shí)，電表指針必須于“0”刻線上，若不是這種情況，則可以用電表上的校正螺絲進(jìn)行調(diào)節(jié)。

5、保持分光光度計(jì)清潔、無(wú)污染，是成功操作的關(guān)鍵。

二、影響顯色反應(yīng)的主要因素

將試樣中被測(cè)組分轉(zhuǎn)變成有色化合物的化學(xué)反應(yīng)叫顯色反應(yīng)。分光光度法一般用于微量組分的測(cè)定，故一般選擇生成有色化合物的、吸光度高的顯色反應(yīng)。但靈敏度高后，反應(yīng)不一定選擇性好，故應(yīng)全面加以考慮。對(duì)于高含量組分的測(cè)定，不一定選用最靈敏的顯色反應(yīng)。

影響顯色反應(yīng)的主要因素有以下幾點(diǎn)：

1、顯色劑用量：通過(guò)實(shí)驗(yàn)來(lái)確定適用量；

2、反應(yīng)液的酸堿度（pH）。溶液酸堿度直接影響金屬離子與顯色劑存在形式以及有色化合物組成的穩(wěn)定性；

3、反應(yīng)溫度：不同的顯色反應(yīng)需要不同的反應(yīng)溫度，一般顯色反應(yīng)可在室溫下完成；

4、顯色反應(yīng)時(shí)間：顯色反應(yīng)的速度有快有慢；

5、干擾離子的影響：應(yīng)采用適當(dāng)方法消除其影響。